Ingénieur / Ingénieure en expérimentation animale (H/F)

Mission :

L'ingénieur de recherche (H/F) intégrera un projet visant à comprendre les mécanismes cellulaires et moléculaires permettant de soutenir la libération de neurotransmetteurs à haute fréquence. Le projet consistera notamment à élucider les mécanismes qui optimisent le trafic des vésicules synaptiques, indispensable au maintien d'une neurotransmission efficace à haute fréquence.

Le cervelet est une structure cérébrale qui contrôle et adapte la motricité en fonction des informations sensorielles et motrices qu'il reçoit du corps et de l'environnement. Ces informations sensorimotrices sont codées sous forme d'activités neuronales à très haute fréquence, auxquelles les synapses du cortex cérébelleux sont capables de répondre grâce à une machinerie présynaptique spécifiquement adaptée à ces fréquences extrêmes.

Nos résultats préliminaires ont permis d'identifier plusieurs protéines impliquées à la fois dans les échanges lipidiques et dans le maintien de la neurotransmission à haute fréquence. Il s'agira d'identifier les partenaires moléculaires de ces protéines et de caractériser, à l'échelle nanoscopique, leur organisation subcellulaire au sein des synapses du cortex cérébelleux impliquées dans la neurotransmission à haute fréquence.

Activités :

Gérer et soutenir l'aspect technique du projet de recherche en apportant son expertise dans les domaines suivants :

• Biologie moléculaire : clonage de plasmide viraux (AAV, lentivirus) pour l'expression de sh-RNA, d'opsine, de protéines fluorescentes ou de Turbo-ID
• Production de lentivirus
• Biochimie : marque de proximité à la biotine (Bio-ID) dans les neurones
• Culture organotypique de cervelet de souris
• Histologie : coupe de cerveau au vibratome ou au cryostat, immunohistochimie, expansion des coupes de cerveau
• Imagerie tridimensionnelle des synapses du cortex cérébelleux par microscopie confocale ou microscopie à feuillet de lumière

-Traitement des images par un logiciel de déconvolution et analyse quantitative de l'imagerie tridimensionnelle